一个抗真菌蛋白在绿色木霉中的分泌表达

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1中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室,上海,200031


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AFP(antifungal protein)是在丝状真菌巨大曲霉(Aspergillus giganteus MDH18894)中分泌的一个抗真菌蛋白. 其mRNA含长度为430 bp的开放阅读框, 编码94个氨基酸的AFP前体, 而成熟的AFP为51个氨基酸的多肽. 根据推测, 在巨大曲霉中, AFP前体可能经两步剪切去除前导序列(43个氨基酸), 并最终形成具有抗真菌活性的成熟AFP, 已有报道证实, 在另一种丝状真菌绿色木霉(Trichoderma viride)基因组中存在一个类似AFP基因但不表达的序列, 该序列与没有内含子的AFP cDNA序列完全一样. 为了解巨大曲霉AFP基因可否在绿色木霉中表达, 将AFP基因开放阅读框插入真菌表达载体trpC基因的启动子和终止子之间, 并成功的转化了绿色木霉. SDS-PAGE和Western印迹分析表明, 绿色木霉转化子分泌表达了具有抗真菌活性的成熟AFP. 为研究在绿色木霉中分泌表达具有重要应用价值的异源真核蛋白质打下了基础.

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语种: 英文   

关键词绿色木霉 巨大曲霉 抗真菌蛋白 分泌表达


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