农杆菌介导的2mG2-epsps 基因转化玉米自交系18-599R 幼胚的研究

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1四川农业大学玉米研究所,四川 温江,611130


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目的对农杆菌介导的抗草甘膦新基因2mG2-epsps 转化玉米18-599R 幼胚的体系进行优化,以获得具有明显草甘膦抗性的转基因植株。方法以玉米18-599R 幼胚为受体,采用农杆菌介导法,对转化时的预处理条件、菌液浓度×浸染时间、草甘膦筛选浓度设置处理,以优化转化体系并用 PCR、实时荧光定量 PCR 和喷洒草甘膦鉴定外源基因在转基因植株中的表达情况。结果热激处理对抗性愈伤率没有明显的提高作用,离心处理会降低抗性愈伤率菌液浓度为 OD600=0.6,浸染时间为10 min 时,平均抗性愈伤率最高,为37.33%草甘膦浓度为2.0 mmol/L 是比较理想的筛选浓度实验共得到46株再生植株,5株 PCR 检测呈阳性,阳性率为10.87%实时荧光定量 PCR 表明外源基因在 T2代植株的根、茎、叶中均有表达对 T2代转基因植株喷洒1.5 g/L 的草甘膦,表现出耐受性。结论实验成功将2mG2-epsps 导入18-599R 基因组,并获得了明显的草甘膦抗性。

DOI: http://dx.doi.org/10.16036/j.issn.1000-2650.2015.03.001

语种: 中文   

基金转基因专项子项目。

关键词2mG2-epsps 18-599R 农杆菌介导法 幼胚


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