猪Ⅱ型圆环病毒-伪狂犬重组病毒活疫苗SA215(C)株的构建(初报)

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1四川农业大学,动物科技学院,四川,雅安,625014


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根据GenBank发表的PCV2序列设计一对特异性引物,采用PCR方法,扩增PCV2 ORF2基因,将ORF2基因插入到含有EGFP报告基因的转移载体质粒pPI-2.EGFP,获得重组中间转移质粒pPI-2.EGFP-ORF2.采用脂质体介导法,将重组中间转移载体pPI-2.EGFP-ORF2与伪狂犬病毒SA215株基因组共转染真核ST细胞,通过空斑纯化得到了表达猪Ⅱ型圆环病毒ORF2基因和绿色荧光蛋白基因的重组伪狂犬病毒SA215(C).经检测,重组病毒能表达具有生物活性的ORF2基因蛋白和绿色荧光蛋白.并且重组病毒及亲本株在同一细胞上的增殖滴度基本相同,表明EGFP和PCV2 ORF2基因的插入不影响PRV SA215的增殖.该重组病毒可作为猪Ⅱ型圆环病毒和伪狂犬病毒候选疫苗毒株.

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DOI: http://dx.doi.org/10.3969/j.issn.1000-2650.2006.02.001

语种: 中文   

基金国家科技攻关项目(2002AA241341)

关键词猪Ⅱ型圆环病毒 ORF2基因 伪狂犬病毒 重组病毒


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